观察微小RNA(miRNA，miR)-30a在肝纤维化中的表达及其对肝纤维化的影响。
方法通过C57BL/6小鼠胆管结扎(对照组10例，胆管结扎组15例)和10 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)处理肝星状细胞(LX-2和HSC-T6)分别构建体内和体外肝纤维化模型。通过转染miR-30a mimics和miR-30a agomir分别在肝星状细胞和小鼠体内过表达miR-30a。提取总RNA和全蛋白进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验检测miR-30a、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)。通过苏木素-伊红(HE)染色、胶原纤维染色(Masson染色)检测肝组织纤维化程度。
结果RT-PCR检测10例对照组和15例胆管结扎组小鼠肝脏miR-30a相对表达水平(2.037±0.256，n＝10；1.007±0.126，n＝15；P<0.01)。10 ng/ml TGF-β1处理肝星状细胞24 h和48 h miR-30a相对表达水平(LX-2：24 h，0.578±0.055，48 h，0.585±0.048；HSC-T6：24 h，0.698±0.055，48 h，0.610±0.033)，明显低于对照组(LX-2：1.013±0.080；HSC-T6：1.001±0.013，P<0.05)，表明miR-30a在体内和体外诱导的肝纤维化模型中表达下降。通过miR-30a mimics转染肝星状细胞株诱导细胞内过表达miR-30a、α-SMA相对表达水平(LX-2：对照组1.024±0.106，miR-30a高表达组0.464±0.021，P<0.05；HSC-T6：对照组1.031±0.095，miR-30a高表达组0.352±0.042，P<0.05)。通过尾静脉注射miR-30a agomir在小鼠体内高表达miR-30a，胆管结扎预处理小鼠α-SMA相对表达水平(对照组2.618±0.116，miR-30a高表达组1.207±0.197，P<0.05)。表明过表达miR-30a能够抑制体内和体外肝纤维化进程。
结论miR-30a在肝纤维化中表达下降，过表达miR-30a能抑制肝纤维化进程。