【摘 要】
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该研究利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究.通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D,G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含N
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该研究利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究.通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D,G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体.采用电穿孔、G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR,FISH定位,Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D,G 组染色体短臂且表达;最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术.该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗.
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