目的 探讨百草枯中毒大鼠肝细胞凋亡、炎症因子表达情况及其发生机制.方法 按随机数字表法将40只Wistar大鼠分为对照组(n=8)与模型组(n=32).模型组腹腔注射20％百草枯浓缩液30 mg/kg;对照组则给予等量生理盐水.制模后0.5、1、3、7d分别处死8只大鼠,收集下腔静脉血及肝组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-1β、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和p53的mRNA表达;采用底物显色法检测3d时肝组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3、-8、-9、-12)的活性;经苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肝组织病理学改变.结果 模型组肝组织出现碎片状坏死、毛细血管扩张、炎性细胞广泛浸润等现象,且随时间延长明显加重.模型组0.5 d时血清IL-1β、TNF-α水平即明显高于对照组[IL-1β(ng/L):220.13±69.74比0.14±0.03,TNF-α(ng/L):102.66±26.43比0.16±0.02,P＜0.01和P＜0.05],分别于3d、1d时达高峰[IL-1β:(423.72±153.11) ng/L,TNF-α:(690.35±229.64) ng/L],随后均逐渐降低,7d时仍明显高于对照组[IL-1β:(357.47±87.28) ng/L,TNF-α:(12.39±5.06) ng/L,均P＜ 0.05].模型组肝组织IL-1β、TNF-α和iNOS的mRNA表达均较对照组明显升高,其峰值分别出现在1d、1d、3d时[IL-1β mRNA(灰度值):1.569±0.057比0.123±0.016,TNF-α mRNA(灰度值):0.683±0.077比0.261±0.025,iNOS mRNA(灰度值):3.259±0.135比0.002±0.001,P＜0.05或P＜0.01].模型组早期p53 mRNA表达与对照组无差异,均为低表达,染毒7d时p53 mRNA表达显著增高(灰度值:2.959±0.086比0.263±0.032,P＜0.01).模型组3d时肝组织caspase活性(pmol/mg)显著高于对照组(caspase-3:857.25±309.26比169.73±48.21,caspase-8:199.18±61.41比32.26±11.09,caspase-9:321.62±80.73比90.38±29.76,caspase-12:413.13±89.77比26.73±9.86,均P＜0.01).结论 百草枯中毒可导致大鼠发生急性肝损伤,caspase-3、-8、-9、-12活性显著增强;肝损伤的发生与TNF-α、iNOS和p53基因早期高表达有密切关系。
早期百草枯中毒大鼠的急性肝损伤研究
【摘 要】
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目的 探讨百草枯中毒大鼠肝细胞凋亡、炎症因子表达情况及其发生机制.方法 按随机数字表法将40只Wistar大鼠分为对照组(n=8)与模型组(n=32).模型组腹腔注射20％百草枯浓缩液30 mg/kg;对照组则给予等量生理盐水.制模后0.5、1、3、7d分别处死8只大鼠,收集下腔静脉血及肝组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)
【机 构】
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510900广东从化,南方医科大学第五附属医院消化内科,510900广东从化,南方医科大学第五附属医院病理科,510900广东从化,南方医科大学第五附属医院消化内科,510900广东从化,南方医科大学
【出 处】
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中华危重病急救医学
【发表日期】
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2014年26期
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