藏绵羊TPI1基因的克隆及其在雄性生殖器官中的表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Water_E
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睾丸支持细胞可通过糖酵解途径为生精细胞的发育提供能量底物.磷酸丙糖异构酶1(triosephosphate isomerase 1,TPI1)是糖酵解代谢过程中的关键酶.为了探究TPI1基因在雄性藏绵羊(Ovis aries)生殖器官发育中的生物学功能,本研究首先克隆TPI1基因cDNA序列,并用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法检测TPI1基因在藏绵羊睾丸和附睾不同发育阶段的表达和分布模式.结果发现,藏绵羊TPI1基因CDS区长度为861 bp(GenBank No.MN847717),可编码286个氨基酸,与其他哺乳动物具有较高的同源性;TPI1基因及其蛋白在不同发育阶段睾丸和附睾中均有表达,但主要在1岁龄和3岁龄表达;TPI1蛋白主要分布于所有发育阶段的睾丸支持细胞和性成熟后(1岁龄和3岁龄)附睾中的精子尾部,在睾丸内的间质细胞、生精细胞以及附睾内的假复层柱状纤毛上皮也有较弱的阳性信号.上述结果表明,TPI1基因可能参与调节睾丸支持细胞和精子鞭毛的糖代谢途径以及附睾假复层柱状纤毛上皮的分泌功能,从而促进精子的形成和成熟.本研究可为进一步探究TPI1基因在绵羊及其他哺乳动物精子发生过程中的调控机制提供基础资料.
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