【摘 要】
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目的 通过分析臭氧暴露后人鼻黏膜上皮细胞中氧化应激相关基因表达的变化,初步探索臭氧暴露引发慢性鼻窦炎的机制.方法 建立人鼻黏膜上皮细胞臭氧暴露体外培养模型,用高通量P
【机 构】
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海军军医大学(第二军医大学)长海医院耳鼻咽喉头颈外科,上海200433
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目的 通过分析臭氧暴露后人鼻黏膜上皮细胞中氧化应激相关基因表达的变化,初步探索臭氧暴露引发慢性鼻窦炎的机制.方法 建立人鼻黏膜上皮细胞臭氧暴露体外培养模型,用高通量PCR芯片技术对臭氧暴露前后鼻黏膜氧化应激相关基因进行检测,并用qRT-PCR进行验证.采用qRT-PCR、蛋白质印迹法及流式细胞术检测臭氧暴露前后培养细胞中环氧化酶2(Cox2)和活性氧(ROS)的表达.结果 用PCR芯片对鼻黏膜上皮细胞中84个氧化应激相关基因进行筛查,发现高强度臭氧暴露后人鼻黏膜上皮细胞中醛酮还原酶家族1成员C2(AKR1C2)、谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)、谷胱甘肽过氧化物酶2(GPX2)、谷胱甘肽还原酶(GSR)、血红素加氧酶1(HMOX1)、NADPH氧化酶(NOX5)、前列腺素内过氧化物酶合酶2(PTGS2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)及丝氨酸肽酶抑制剂(Kazal型)1(SPINK1)9个基因表达上调,而趋化因子配体5(CCL5)、细胞球蛋白(CYGB)、可溶性环氧化酶水解酶2(EPHX2)、谷胱甘肽S-转移酶zeta 1(GSTZ1)、角蛋白1(KRT1)、组氨酸磷酸酶(LHPP)、肌球蛋白(MB)、MPV17线粒体内膜蛋白(MPV17)、硒蛋白P(SEPP1)及转运蛋白颗粒复合物6A(TRAPPC6A)10个基因表达下调.同时,臭氧暴露导致ROS大量生成(暴露组及对照组荧光强度:184.3±6.8 vs 13.0±1.4,P<0.05),Cox2 mRNA及蛋白表达水平升高(暴露组与对照组mRNA相对表达量:6.4±1.2 vs 1.0±0.0,P<0.05;暴露组与对照组蛋白相对表达量:11.7±2.6 vs 13.8±1.5,P<0.05).结论 臭氧暴露后GSTZ1、NOX5、SOD2等相关基因参与鼻黏膜氧化应激调控,臭氧暴露引发鼻黏膜炎症反应可能与这些基因调控Cox2表达的相关信号通路有关.
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