论文部分内容阅读
利用PCR技术，从B型产气荚膜梭菌中国标准株C58—1株扩增出β1毒素基因，连接pMD18-T载体筛选阳性克隆，然后用限制性核酸内切酶BamHI和SalI对其进行酶切，回收927bp的G1毒索基因片段，将其定向克隆到载体pET-32a中，获得重组质粒pET13927。将pET13927转化至受体菌BL21（DE3）中，其表达产物经His-TrapFF预装柱纯化、SDS-PAGE检测目的蛋白大小和分布及Western blotting检测其反应原性。结果表明，完整的81毒素基因大小为1011bp，与GenB