shRNA沉默eIF4E基因表达对人喉癌细胞Hep-2生物学行为的影响

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目的构建靶向真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的shRNA表达载体,观察eIF4E表达抑制对喉癌细胞生物学行为的影响。方法根据人eIF4EmRNA序列设计并构建2个靶向人eIF4E基因的shRNA真核表达载体(pSilencer 4.1-sl和pSileneer4.1-s2);然后以脂质体转染的方法将shRNA表达质粒转染至人喉癌细胞系Hep-2,经G418筛选出稳定转染的阳性细胞;分别通过反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blotting技术对构建成功的2个shRNA干扰质粒进行
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