转录反式激活因子对DNA-PKcs启动子的调控作用

来源 :国际放射医学核医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZuoLuo
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目的 检测人类免疫缺陷病毒转录反式激活因子( TAT)对DNA依赖蛋白激酶催化亚单位( DN A-PKcs)基因启动子活性的影响.方法 用PCR方法克隆DNA-PKcs基因启动子的系列截短体,通过DNA重组构建pGL3-basic-DN A-PKcs肩动子报告质粒载体,通过双荧光素酶报告基因检测DNA-PKcs基因的肩动子活性,采用基于乳糖抑制子和乳糖操纵子并结合绿色荧光蛋白分子荧光的大规模染色质松弛报告系统观察染色质的重构活性,并研究了电离辐射对TAT参与染色体重构的影响.结果构建了DNA-PKcs启动子(全长区域为-939 bp~-1 bp)的系列截短体的报告质粒载体,鉴定出其核心区域为-64 bp~-1 bp.TAT能够抑制DNA-PKcs基因启动子的转录活性.TAT具有大规模的染色体松弛活性,电离辐射能抑制TAT参与染色体重构的作用.结论 TAT能抑制DNA修复基因DNA-PKcs的启动子活性,电离辐射能抑制TAT参与染色体重构的作用。

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