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目的
探索甲型流感病毒NP-M2e融合蛋白在大肠埃希菌中可溶性高效表达和纯化的条件。
方法将NP-M2e融合基因(NM2e)经密码子优化后插入pET30a后获得pET30a-NM2e原核表达质粒，通过转化BL21(DE3)后的克隆筛选、诱导温度与诱导时间等条件的优化实现NM2e蛋白在大肠埃希菌中的可溶性高效表达；表达产物经离子交换层析与分子筛层析纯化并通过Western-Blot鉴定其抗原性。
结果NM2e基因正确插入pET30a中并能在大肠埃希菌中表达；25℃温度诱导下NM2e蛋白出现可溶性表达，诱导时间由4 h延长至10 h可明显提高蛋白表达量；可溶性NM2e蛋白经阴离子交换和凝胶过滤层析两步纯化后的纯度可达90%，纯化产物能特异性结合NP鼠多抗及M2e鼠单抗。
结论甲型流感病毒NM2e融合蛋白能在大肠埃希菌中高效表达和纯化并保持良好的免疫反应活性。