华蟾素联合多柔比星通过Fas/线粒体通路促进肺癌A549细胞凋亡

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目的探究华蟾素联合多柔比星对肺癌A549细胞凋亡及Fas/线粒体通路的影响。方法用不同浓度华蟾素(0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L)、不同浓度多柔比星(0、0. 25、0. 5、1. 0、2. 0μg/m L)或联合用药(多柔比星0. 5μg/m L分别与华蟾素0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L联合使用)处理A549细胞。四甲基偶氮唑(MTT)法检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞增殖的影响;流式细胞仪检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞凋亡的影响;蛋白质印迹(Western blot)技术检测A549细胞Fas/线粒体凋亡通路相关蛋白的表达变化。结果 MTT结果显示,华蟾素和多柔比星对A549细胞均具有增殖抑制作用(P <0. 05),且呈时间-剂量依赖关系。0. 5μg/m L多柔比星分别与0. 1、0. 2、0. 4、0. 8μg/m L华蟾素联合处理下,A549细胞的增殖抑制率呈时间-剂量依赖性。(2)流式细胞仪结果显示,与空白对照组比较,单用0. 4μg/m L华蟾素或0. 5μg/m L多柔比星处理后A549细胞凋亡率显著上升(P <0. 05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞凋亡率显著上升(P <0. 05)。(3)Western blot结果显示,与空白对照组比较,单用0. 4μg/m L华蟾素或0. 5μg/m L多柔比星处理后A549细胞Fas、Fas L、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P <0. 05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞Fas、Fas L、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P <0. 05)。结论华蟾素联合多柔比星可显著促进肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与Fas/线粒体凋亡通路强化有关。
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