【摘 要】
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目的:获得能够稳定表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)的内皮细胞株.方法:构建重组慢病毒表达载体,在293FT细胞中进行病毒的包装,用获得的高滴度
【机 构】
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军事医学科学院野战输血研究所,北京工商大学,解放军316医院
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目的:获得能够稳定表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)的内皮细胞株.方法:构建重组慢病毒表达载体,在293FT细胞中进行病毒的包装,用获得的高滴度慢病毒感染EA.hy926细胞株,建立能够稳定、高效表达hCM-CSF,hIL-4的EA.hy926细胞株.结果:EA.hy926感染效率达90%以上,长期传代后阳性率仍维持在90%以上;实时定量PCR和ELISA方法证实感染后细胞hGM-CSF、hIL-4在mRNA水平的表达分别是未感染细胞的25倍和9946倍,在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的145倍和23倍.结论:构建的细胞系可以稳定表达细胞因子GM-CSF、IL-4.
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