表达靶向禽流感病毒多靶点miRNA重组慢病毒的制备及病毒感染效率检测

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaobi68029616802961

【摘要】

：

慢病毒介导的RNAi具有转移基因效率高,作用持久稳定等特点,成为基因治疗和基因功能研究的重要工具。本试验中将在细胞水平验证可以抑制禽流感病毒（AIV）PA、NP和PB2基因表达的mi

【作者】

：

田进张在平孟庆文谭复善崔雷

【机构】

：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2010年5期

【关键词】

：

RNAI 多靶点慢病毒感染效率 RNAi multi-target lentivirus infected rate

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30771615）, “十一五”国家科技支撑计划资助项目（2008BADB2B01）, 国家重点实验室基金资助项目（NKLVBP200829）

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慢病毒介导的RNAi具有转移基因效率高,作用持久稳定等特点,成为基因治疗和基因功能研究的重要工具。本试验中将在细胞水平验证可以抑制禽流感病毒（AIV）PA、NP和PB2基因表达的miRNA克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体,构建多靶点miRNA表达载体（pcDNA6.2/PA＋NP＋PB2）;鉴定正确后通过BP/LR重组反应将GFP和靶向AIV串联miRNA转座到慢病毒表达载体pLenti6/DEST,命名为pLenti6/PA＋NP＋PB2;鉴定正确后与辅助包装质粒共转染293FT

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