【摘 要】
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目的:探讨乙型肝炎病毒e抗原基因在大肠杆菌中进行高效融合表达,并对表达条件进行优化和影响因素的分析。方法:从乙肝患者阳性血清中提取DNA,设计引物扩增目的基因,按常规方
【机 构】
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华南理工大学轻工与食品学院,广州万孚生物技术有限公司,
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目的:探讨乙型肝炎病毒e抗原基因在大肠杆菌中进行高效融合表达,并对表达条件进行优化和影响因素的分析。方法:从乙肝患者阳性血清中提取DNA,设计引物扩增目的基因,按常规方法克隆入pET-GST载体谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导目的基因片段的表达,经超声处理后SDS-PAGE电泳。对表达条件进行正交试验优化,并分析其影响因素的大小。结果:HBeAg以包涵体形式表达出来,其表达的GST融合蛋白的分子质量大约为44KD。最佳的表达条件为温度为30℃,IPTG浓度为0.6mmol/L,诱导时间为2h。其影响因素大小依次为诱导温度>诱导时间>IPTG浓度。结论:乙肝e抗原基因在大肠杆菌中获得了高效表达。
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