【摘 要】
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本文分离转基因小鼠骨髓造血干细胞。运用针对小鼠干细胞表面特异表达的干细胞抗原 1(stemcellantigen 1,Sca 1)的单克隆抗体和包被于磁颗粒表面的第二抗体 ,采用磁吸附细胞
【机 构】
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上海第二医科大学附属瑞金医院分子医学诊断中心,上海血液学研究所,上海血液学研究所,上海铁路中心医院血液科,上海转基因动物实验中心,上海血液学研究所,上海血液学研究所 上海200072,上海200025
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本文分离转基因小鼠骨髓造血干细胞。运用针对小鼠干细胞表面特异表达的干细胞抗原 1(stemcellantigen 1,Sca 1)的单克隆抗体和包被于磁颗粒表面的第二抗体 ,采用磁吸附细胞分选方法 (MACS )分离小鼠骨髓造血干细胞 ,用流式细胞术 (FACS )检测MACS分离后骨髓细胞中干细胞 (Sca 1阳性细胞 )比例 ,监测细胞分选效果。结果显示MACS分离后骨髓细胞中Sca 1阳性细胞所占比例达 85 %以上 ,涂片观察发现细胞组成和细胞形态学特征与FACS所得结果一致。MACS可以从转基因小鼠全骨髓细胞中分离出Sca 1阳性的骨髓造血干细胞 ,细胞纯度可达 85 %以上。
In this paper, transgenic mouse bone marrow hematopoietic stem cells were isolated. Mouse bone marrow hematopoiesis was isolated by magnetic adsorption cell sorting (MACS) using a monoclonal antibody against stem cell antigen 1 (Sca 1) specifically expressed on the surface of mouse stem cells and a second antibody coated on the surface of the magnetic particle The percentage of stem cells (Sca 1 positive cells) in bone marrow cells after MACS separation was detected by flow cytometry (FACS) and the cell sorting effect was monitored. The results showed that the proportion of Sca 1-positive cells in bone marrow cells after MACS separation was over 85%. The results of smear analysis showed that the composition of cells and the morphology of cells were consistent with those obtained by FACS. MACS can isolate Sca 1-positive myeloid hematopoietic stem cells from transgenic mouse bone marrow cells with cell purity of over 85%.
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