绿色荧光蛋白表达载体的改造和表达

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为获得增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的真核表达载体pEGFP—N1—MSC,并观察其在猪成纤维细胞中的表达情况,用Nhe Ⅰ和Age Ⅰ消除pEGFP—N1质粒上的多克隆位点(MSC),然后补平连接,获得增强型绿色荧光蛋白编码基因的真核表达载体pEGFP—N1—MSC质粒,将pEGFP—N1-MSC质粒转化DH5α感受态细胞,于Kan^r+LB平板上筛选阳性克隆。重组子经Nhe Ⅰ和Age Ⅰ双酶切鉴定,将该载体转染猪成纤维细胞,24h
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