β人绒毛膜促性腺激素在毕赤酵母中的表达及鉴定

来源 :生殖医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lxq19840808

【摘要】

：

目的在毕赤酵母表达系统中获得β人绒毛膜促性腺激素(hCG)高效分泌表达,并鉴定其抗原活性.方法将β hCG基因亚克隆入pPIC9K表达载体,线性化后转化GS115酵母细胞,经G418抗性筛

【作者】

：

郑俊峰王桂玉于和鸣马旭

【机构】

：

中国协和医科大学,国家人口计生委科学技术研究所

【出处】

：

生殖医学杂志

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

人绒毛膜促性腺激素毕赤酵母表达载体 Human chorionic gonadotropin Pichia pastoris Expression vect

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目的在毕赤酵母表达系统中获得β人绒毛膜促性腺激素(hCG)高效分泌表达,并鉴定其抗原活性.方法将β hCG基因亚克隆入pPIC9K表达载体,线性化后转化GS115酵母细胞,经G418抗性筛选获多拷贝重组子并诱导表达.表达产物采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot、酶链免疫吸附试验(ELISA)鉴定. 结果经甲醇诱导,酵母细胞表达出β hCG,此蛋白在SDS-PAGE电泳上显示为一条分子量为32×103阳性条带,在Western blot试验中能被β hCG多

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