【摘 要】
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为了优化猪卵巢颗粒细胞体外培养体系,探索N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)对猪卵巢颗粒细胞生长、增殖活力及激素分泌的影响,试验以原代培养的猪卵巢颗粒细胞为研究
【机 构】
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天津市畜牧兽医研究所,天津300381;中国农业大学动物科学技术学院,北京100193;河北农业大学动物科技学院,河北保定071001;宁波三生药业有限公司,浙江宁波315100
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为了优化猪卵巢颗粒细胞体外培养体系,探索N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)对猪卵巢颗粒细胞生长、增殖活力及激素分泌的影响,试验以原代培养的猪卵巢颗粒细胞为研究对象,设置4个NAC梯度浓度试验组(50,100,500,1 000 μmol/L)和1个空白对照组培养基进行体外培养;通过全自动细胞计数仪记录细胞生长情况,利用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,采用放射免疫法测定类固醇激素分泌水平.结果表明:体外培养的前48 h内,4个NAC梯度浓度试验组猪卵巢颗粒细胞数量显著高于空白对照组(P＜0.05),且100 μmol/L浓度NAC试验组的猪卵巢颗粒细胞增殖活力显著高于空白对照组(P＜0.05).体外培养48 h后,4个NAC梯度浓度试验组猪卵巢颗粒细胞数量和增殖活力与空白对照组比较均差异不显著(P＞0.05).以培养48 h猪卵巢颗粒细胞的培养基作为测定类固醇激素的对象,同样得出100 μmol/L浓度NAC试验组的孕酮和雌二醇分泌量显著高于空白对照组(P＜0.05).说明NAC添加浓度为100 μmol/L时有利于猪卵巢颗粒细胞体外培养前期的贴壁生长、增殖以及细胞增殖活力的提升.
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