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目的 探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在原代小鼠视网膜神经节细胞(RGC)缺氧模型中对抗缺氧损伤的神经保护作用机制.方法 原代细胞取材于C57BL/6小鼠视网膜,Thy-1、Bm-3a、神经丝蛋白(Neurofilament)进行细胞鉴定.实验组:常氧对照组、Ad-CREB组、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组、缺氧模型组.缺氧环境由三气培养箱构建,条件为:94％ N2,5％ CO2,1％O2.各组细胞在24、48h CREB、脑源性神经营养因子(BDNF)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、磷酸肌醇3激酶(PI3K) mRNA及蛋白水平通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot检测.结果 观察到细胞中有Thy-1、Brn-3a、Neurofilament表达,证实细胞为RGC.在荧光显微镜下RGC可表达GFP,说明CREB成功转染.阿尔玛蓝(Alarmar Blue)检测结果显示常氧对照组和Ad-CREB组RGC活性明显高于Ad-GFP组和缺氧模型组(P＜0.05).RT-qPCR和Western blot结果显示Ad-CREB组中CREB、BDNF、bcl-2、PI3K mRNA(2.213±0.609、0.703±0.053、0.873±0.075、2.280±0.399)及蛋白表达(0.403 ±0.011、0.369 ±0.006、0.516±0.014、0.652 ±0.011)较Ad-GFP组(mRNA:0.458±0.066、0.432±0.023、0.555±0.103、1.076±0.011;蛋白:0.273 ±0.003、0.188±0.012、0.404 ±0.013、0.439±0.017)、缺氧模型组(mRNA:0.800±0.156、0.287±0.023、0.443 ±0.083、1.096 ±0.286;蛋白:0.194±0.005、0.134±0.006、0.331±0.011、0.369 ±0.010)明显上调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 过表达CREB通过激活PI3K信号通路,上调bcl-2调节胞内BDNF的表达水平,从而调控RGC的存活,CREB可能是起到保护视神经作用的治疗新靶点.