miRNA-136-5p对急性脊髓损伤模型大鼠炎症因子的作用

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panzi911
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背景:miRNA-136-5p对脊髓损伤后病理改变、炎症反应和再生修复产生重要的调节作用。目的:观察miR NA-136-5p对大鼠脊髓损伤后血清细胞炎性因子、脊髓组织NF-κB蛋白的影响,探讨其作用分子机制。方法:SPF级雄性SD大鼠36只,购买于广西医科大学动物实验中心。制备慢病毒载体系统转染脊髓损伤大鼠。改良Allen’s法成功建立36只大鼠脊髓损伤模型,对大鼠进行Basso Beattie Brenham(BBB)评分,随机分成正常对照组、模型组(LV-ctrl+脊髓损伤组)、过表达组(脊髓损伤+LV-miRNA-136-5p)、抑制组(脊髓损伤+LV-sponge抑制组),每组9只。手术前7 d及手术当天过表达组、抑制组在损伤区连续注射慢病毒悬液,正常对照组、模型组注射等量生理盐水。各组在第1,3,7天分别处死3只大鼠,取血、脊髓组织。ELISA测定大鼠血清白细胞介素1β,白细胞介素6和干扰素α表达水平;Western Blot和双重免疫荧光检测NF-κB蛋白的表达。结果与结论:①术前BBB评分结果无显著差异(P> 0.05);脊髓损伤模型组大鼠活动表现为俯卧位缓慢行走,出现不同程度的尿潴留,双后肢的运动、感觉功能完全丧失,肌肉力量为0,出现脊髓休克;②与正常对照组相比,其他3组炎症因子水平均有升高(P <0.05),过表达组各种炎症因子水平升高更加明显;各组炎症因子水平分别按过表达组、模型组、抑制组顺序逐渐递减;③Western Blot、双重免疫荧光检测NF-κB蛋白表达水平,模型组、过表达组、抑制组均高于正常对照组(P <0.05),其中过表达组表达水平最高;④结果提示,miRNA-136-5p对急性脊髓损伤大鼠炎症因子、NF-κB可产生影响。
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