转基因番木瓜55-1的多重PCR鉴定方法研究

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目的:建立对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定的多重PCR检测方法。方法:根据番木瓜管家Papain基因和转基因番木瓜55-1品系的外源结构基因(35S-GUS)和调控基因(NOS)序列设计合成特异性检测引物。采用多重PCR技术对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定。结果:本研究建立的多重PCR反应体系、反应参数能特异性地同时扩增转基因番木瓜55-1的管家基因Papain、外源结构基因35S-GUS和调控基因NOS序列。其中针对管家基因和外源结构基因的双重PCR检测方法的绝对检测低限为0.14 ng,其相对检测低限为0.14%;三重PCR检测方法的绝对检测低限为1.56 ng,其相对检测低限为1.56%。结论:本检测方法有较高稳定性,能快速准确地对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定,该方法的检测灵敏度可基本上满足转基因食品标识管理定性检测的需要。
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