【摘 要】
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目的构建针对HER2基因RNA干扰的真核表达载体并筛选出HER2基因的高效RNA干扰序列。方法采用化学合成方法合成三段针对HER2基因的shRNA,通过酶切连接方法与真核表达载体pSuper
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目的构建针对HER2基因RNA干扰的真核表达载体并筛选出HER2基因的高效RNA干扰序列。方法采用化学合成方法合成三段针对HER2基因的shRNA,通过酶切连接方法与真核表达载体pSuper/GFP/neo相连接,构建针对HER2基因的RNA干扰载体,并通过酶切和测序方法鉴定是否含有设计的shRNA。应用脂质体转染试剂分别转染载体到人乳腺癌SK-BR-3细胞中,采用实时定量PCR和Western印迹检测其对HER2基因沉默的效果。结果 EcoRⅠ和HindⅢ进行双酶切鉴定,281 bp条带出现,证明质粒中
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