简化四步法低温保存角膜的实验研究

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目的:探索简易安全的冻贮角膜技术.方法:对经典的Capella四步冻贮法的冷冻保护液、降温冷冻速率和复温方法3项关键技术做了全面简化和改进.以台盼蓝和茜素红联合染色评价家兔和人尸角膜内皮细胞存活率(ESR)及光镜下内皮细胞形态.结果:优选出"简化四步法"冻贮技术:以20%人血清白蛋白与2%、4%、6%和7.5%二甲基亚砜配制4种冷冻保护液;角膜分别在4种液体中冷平衡15min;在简易降温仪内先以1~3℃/min降温至-30℃,再以3~10℃/min降温至-80℃;液氮中贮存;40℃水浴中复温.本组ESR(92.6%,n=30)与Capella组(93.4%,n=30)比较,差异无显著性(P>0.05),两组间内皮细胞形态相仿.结论:简化四步法是一种简易而安全的深低温保存角膜技术.

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