[目的]探讨不同剂量中波紫外线(UVB)照射人皮肤成纤维细胞诱导的自噬对细胞凋亡活性的影响.[方法]人皮肤成纤维细胞来自于23岁健康男性环切术后包皮的原代培养,连续传代培养后取第3~ 10代的细胞进行实验.通过单丹酰戊二胺(MDC)染色和免疫荧光标记微管相关蛋白1轻链3(LC3)的方法,确定不同剂量3-甲基腺嘌呤(3-MA)对自噬的抑制作用.UVB照射后立即加入0.5 mmol/L 3-MA孵育细胞4h作为自噬的抑制方法.Hoechst和碘化丙啶(PI)染色结合Annexin V-异硫氰酸荧光索(FITC)和PI标记细胞后流式细胞仪检测作为细胞凋亡的定性和定量方法.[结果]0.5 mmol/L 3-MA能明显抑制人皮肤成纤维细胞自噬活性(饥饿诱导组自噬细胞阳性百分数为63.037%±5.876%,3-MA孵育后下降至34.425%±5.183%).空白对照组、30、50、100mJ/cm2UVB照射组标记LC3绿色荧光信号逐渐增强,照射后立即对上述4组加入3-MA孵育4h则LC3蛋白表达差异不明显.0.5 mmol/L 3-MA对细胞活性影响最小.50 mJ/cm2 UVB照射下加入3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞增多;100 mJ/cm2 UVB照射后加3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞减少.Annexin V -FITC和PI标记细胞后流式细胞仪分析显示,在50 mJ/cm2 UVB照射下,抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[( 10.933±0.839)%]较未抑制细胞[(7.267±0.473)%]上升,两者之间差异具有统计学意义(t=5.20,P< 0.05);而在100mJ/cm2UVB照射下,抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[(7.100±0.781)%]较未抑制细胞[( 10.133±0.681)%]下降,两者之间差异具有统计学意义(t=6.29,P< 0.05).[结论]50 mJ/cm2 UVB照射诱导人皮肤成纤维细胞自噬通过抑制凋亡对细胞起到保护作用,而在100 mJ/cm2 UVB照射下发生的较高水平自噬可能诱导了自噬性细胞死亡。
中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞自噬对凋亡影响的初步研究
【摘 要】
:
[目的]探讨不同剂量中波紫外线(UVB)照射人皮肤成纤维细胞诱导的自噬对细胞凋亡活性的影响.[方法]人皮肤成纤维细胞来自于23岁健康男性环切术后包皮的原代培养,连续传代培养后取第3~ 10代的细胞进行实验.通过单丹酰戊二胺(MDC)染色和免疫荧光标记微管相关蛋白1轻链3(LC3)的方法,确定不同剂量3-甲基腺嘌呤(3-MA)对自噬的抑制作用.UVB照射后立即加入0.5 mmol/L 3-MA孵育细
【机 构】
:
210042南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省常熟市新区医院,210042南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,210042南京,中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所
【出 处】
:
中华皮肤科杂志
【发表日期】
:
2012年45期
论文部分内容阅读
其他文献
目的:为了更好地贯彻《传染病防治法》,防止传染病的迟报、漏报。方法:分析现有传统的传染病填卡报告方法存在的问题。结果:填卡报告方法存在着中间环节多,信息失真、滞后。
小鼠皮肤移植模型是研究T淋巴细胞识别同种异体抗原机制的标准方法,亦是探讨免疫排斥反应及鉴定近交系小鼠的基本方法之一[1].根据移植皮片的来源不同,目前常用的小鼠皮肤移植方法有背-背法、耳-背法、尾-背法等[2].我们在参考相关文献的基础上,建立小鼠耳朵来源皮片的皮肤移植模型,现报告如下。
随着中国经济的发展和科技进步,我国的汽车制造进入高速发展时期.这就要求汽车制造企业不断的更新产品和提高生产能力,同时越来越多的新技术应用于汽车制造领域.车身焊接是汽
[目的]探讨E型重组主外膜蛋白(rMOMP)对恒河猴诱导产生的特异性免疫应答效应.[方法]恒河猴分3组,每组2只,分别为佐剂蛋白组、佐剂组、对照组.各组均于第0(免疫起始周)、2、4周双侧肱三头肌注射蛋白疫苗、佐剂和磷酸盐缓冲液(PBS).末次免疫后2周,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测恒河猴血清中沙眼衣原体特异性IgG抗体和干扰素γ(IFN-γ),以及阴道冲洗液中沙眼衣原体特异性sIgA抗体,
目的总结有肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后气胸的诊治体会。方法 2000年1月至2013年8月,中山大学附属第三医院有肾区手术史的腹腔镜肾癌根治术后共发现8例气胸患者,均经胸部
第一节前言rn神经修复学(neurorestoratology)是神经科学的一个亚学科,专门研究神经系统损害部分的神经再生、结构修补或替代、神经重塑、神经保护和神经调控恢复机制.神经修
针对某核电厂2号机组凝结水母管调节阀出现的阀门振荡和管线振动,经过一系列诊断、分析,阀体和阀笼设计选型不当或者阀门填料设计选型不当是引起阀门振荡、管线振动的根本原
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
对国内外改善焦炭热性能的配煤添加剂研究现状进行了综述,总结出不同配煤添加剂的性质及其改善焦炭热性能的效果,探讨了其作用机理.指出配煤添加剂可扩大炼焦煤资源,降低炼焦