天麻扩增酶切片段长度多态性反应体系的优化

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以新鲜天麻为材料,优化天麻扩增长度多态性(AFLP)反应体系中的几个关键参数。结果表明,用100-200ng/μL的天麻DNA2.5μL,反应体系25μL,37℃酶切连接过夜,酶切连接效果最佳;预扩产物稀释20倍,TaqDNA聚合酶为1U,Mg^2+(20mM)1.5μL、dNTP(2mM)2μL时选扩条带最清晰。体系优化后,扩增产物稳定,条带十分清晰,无背景干扰,这为构建天麻的AFLP指纹图谱和分子标记辅助育种提供了有力支撑。
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