基于网络药理学和细胞功能实验探析蠲痹强骨方调控FGFR1通路对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞生物学行为的影响

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基于网络药理学和细胞功能实验研究国医大师经验方蠲痹强骨方(JBQGFs)治疗类风湿关节炎(RA)的潜在分子作用机制。通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药百科全书数据库(ETCM)等获取JBQGFs的主要活性成分和作用靶点,对核心靶点进行功能富集分析以及信号通路分析,采用Cytoscape 3.6.0构建JBQGFs的“活性成分-靶点-信号通路”的可视化网络。通过筛选获得JBQGFs潜在作用通路9条,主要包括G蛋白偶联受体信号通路、酪氨酸激酶受体的信号传导通路等。结合课题组前期通过单细胞测序发现FGFR1信号通路在RA活动期滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)中高度活化,通过细胞及动物实验证实抑制成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1, FGFR1)信号通路可以明显减轻CIA大鼠关节炎症及关节破坏。随后聚焦于酪氨酸激酶受体信号传导通路,对其进一步靶基因分析发现FGFR1可能是JBQGFs治疗RA的潜在靶点。通过Western blot实验、Transwell侵袭实验以及血管翳骨片侵蚀实验初步验证了JBQGFs抑制FGFR1的磷酸化而发挥生物学效应,进而抑制基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase 2 , MMP2)和NF-κB配体受体激活因子(receptor activator of nuclear factor-κ B ligand , RANKL) 从而抑制RA成纤维细胞的侵袭,抑制血管翳的骨片侵蚀效应,为进一步通过网络药理学方法寻找治疗RA潜在的靶点和中医药治疗药物提供了思路。
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