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摘要： 目的 观察川芎嗪对丙泊酚致小鼠学习记忆障碍的影响。方法 将小鼠分为3组：生理盐水组（NS组）、丙泊酚组（P组）和川芎嗪+丙泊酚组（LP组），每组10只。用避暗实验（step- through test）分别观察24 h后记录小鼠的潜伏期和错误次数。结果 与NS组相比，P组潜伏期缩短（P
关键字：川芎嗪；丙泊酚；避暗实验；学习记忆障碍
丙泊酚（propofol）是临床上常用的麻醉药。有文献报道，用丙泊酚麻醉行短小手术的患者停药后的数小时内仍有学习、语言、判断等认知功能异常[1]。实验证明，丙泊酚可导致小鼠学习记忆障碍[2]。川芎嗪（ligustrazine，Lig）具有清除氧自由基、抗血小板聚集、扩张小动脉、改善微循环等作用，临床应用都较为广泛[3-4]。近年来，川芎嗪因其对中枢神经的药理作用多样而逐渐受到重视[5]。然而，关于川芎嗪在学习记忆方面研究较少。
本研究以小鼠为试验对象，采用避暗实验（step-through test）观察实施丙泊酚后记忆的变化，并在试验组中加入川芎嗪，以探讨川芎嗪对丙泊酚致记忆障碍的干预作用，为临床防治患者全麻后记忆障碍提供参考。
1 材料和方法
1.1 实验动物 昆明种小鼠30只，雌雄各半，体重20～25 g，由徐州医学院实验动物中心提供，实验前1天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日上午9：30～12：00进行实验。
1.2 实验药品 丙泊酚注射液（Fresenius Kabi AB公司，批号：UL16844），磷酸川芎嗪注射液（河南天方药业股份有限公司，批号：080540180），均用生理盐水（NS）稀释成所需浓度。
1.3 主要仪器 BA-500小鼠避暗仪（成都泰盟科技有限公司）。
1.4 动物分组及处理 按分层随机区组设计，使各组小鼠雌雄比例、平均体重基本相同，将小鼠分为3组：生理盐水组（NS组）、丙泊酚（10mg·kg-1）组（P组）、川芎嗪（100 mg·kg-1）+丙泊酚（10mg·kg-1）组（LP组），每组10 只。训练前30 min，LP组腹腔注射川芎嗪，P组注射NS；15 min后，LP组、P组再腹腔注射丙泊酚。训练前15 min，NS组腹腔注射生理盐水。所有的药物均按照10 ml·kg-1的剂量给予。
1.5 避暗实验 实验装置分为明暗两室，两室之间有一直径为3 cm的圆洞，暗室底部铜栅通电。训练时先将小鼠放入反应箱中适应5 min，然后暗室底部铜栅通以33 V、50 Hz交流电，将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室即受电击。训练时潜伏期大于180 s者弃去不用。用药后24 h再次将小鼠放入明室，记录第1次进入暗室的时间（潜伏期）和5 min内进入次数（错误次数）。如果5 min时小鼠仍未进入暗室，错误次数记为0次，潜伏期记为300 s。
1.6 统计学处理 错误次数及潜伏期均用± s表示，用SPSS 13.0软件进行数据处理，用单因素方差分析LSD检验，检验水准：α = 0.05。
2 结 果
与NS组相比，P组潜伏期缩短，错误次数增加（P<0.05）；与P组相比，LP组错误次数明显减少（P<0.01），潜伏期有增长趋势，但差异无显著性（P>0.05）。见表1。表1 川芎嗪对丙泊酚所致小鼠记忆障碍的影响
3 讨 论
国内外常用避暗实验来研究记忆。避暗实验是利用小鼠嗜暗习性而设计的，属于被动回避反应（passive avoidance response），以潜伏期和错误次数作为指标，动物间差异较小，对记忆过程特别是对记忆的再现有较高的敏感性。
丙泊酚是目前临床最常用的静脉全身麻醉药物之一，具有起效快速、苏醒迅速、持续输注后无蓄积等优点，因而普遍用于临床麻醉诱导与维持、ICU镇静等。γ-氨基丁酸（γ-butylamino acid， GABA）受体是丙泊酚重要的作用靶位，可使Cl-内流，产生超极化，从而降低神经元兴奋性[7]；此外，丙泊酚对N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）受体激活也有一定抑制作用[8]，此作用也可能参与对记忆的抑制。
川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，化学结构为四甲基吡嗪。近期研究显示川芎嗪对海马神经元的Ca2+通道有阻滞作用，可以明显保护海马神经元。而海马神经元与记忆密切相关[9]。根据文献报道，川芎嗪可能激活胆碱能神经系统的活性，提高脑内乙酰胆碱的含量[9-10]。本实验结果表明，小鼠腹腔注射川芎嗪对丙泊酚所致的学习记忆障碍有改善作用可能与上述作用有关。也可能与其扩张血管，促进脑循环作用有关，有待进一步深入研究。
【参考文献】
[1] 孙国勤，徐惠芳，江伟，等. 异丙酚对顺行性遗忘和逆行性遗忘的影响[J]. 中华麻醉学杂志，2000，20（10）：612-614.
[2] 许继元，戴体俊，莫逊，等. 丙泊酚对小鼠学习记忆功能的影响[J]. 徐州医学院学报，2008，28（1）：1-3.
[3] 周昌奎，吴晓华. 川芎嗪临床应用及研究进展[J]. 海峡药学，2004，16（6）：3-4.
[4] 王艳萍，李文兰，范玉奇. 川芎嗪药理作用的研究进展[J]. 药品评价， 2006，3（2）：144-150.
[5] 纳鑫，汪雪兰，皮荣标. 川芎嗪对中枢神经系统的药理作用及其机制的研究进展[J]. 中药新药与临床药理，2008，19（1）：77-79.
[6] 王擒云，杨建平，戴体俊，等. GABA_A受体部分介导丙泊酚在中脑导水管周围灰质腹外侧区的致痛觉过敏作用[J]. 中国药理学通报，2006，22（2）：175-180.
[7] 魏辉明，李棋，于涛，等. 丙泊酚对中枢神经系统突触后膜受体反应性的影响及机制[J]. 昆明医学院学报，2006，27（4）：135-139.
[8] 高长越，周华东，邓娟，等. 川芎嗪对脑缺血再灌注损伤后细胞间粘附作用的影响[J]. 中国中西医结合急救杂志，2002，9（3）：135-139.
[9] 孙文虹，丁晓飞，郭丽萍，等. 川芎嗪促进促进大鼠学习记忆的研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版，2004，20（1）：11-16.
[10] 祖莹，万梅绪，倪小虎，等. 川芎嗪改善东莨菪碱致大鼠学习记忆障碍研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版 ，2005，21（6）：681-683.
关键字：川芎嗪；丙泊酚；避暗实验；学习记忆障碍
丙泊酚（propofol）是临床上常用的麻醉药。有文献报道，用丙泊酚麻醉行短小手术的患者停药后的数小时内仍有学习、语言、判断等认知功能异常[1]。实验证明，丙泊酚可导致小鼠学习记忆障碍[2]。川芎嗪（ligustrazine，Lig）具有清除氧自由基、抗血小板聚集、扩张小动脉、改善微循环等作用，临床应用都较为广泛[3-4]。近年来，川芎嗪因其对中枢神经的药理作用多样而逐渐受到重视[5]。然而，关于川芎嗪在学习记忆方面研究较少。
本研究以小鼠为试验对象，采用避暗实验（step-through test）观察实施丙泊酚后记忆的变化，并在试验组中加入川芎嗪，以探讨川芎嗪对丙泊酚致记忆障碍的干预作用，为临床防治患者全麻后记忆障碍提供参考。
1 材料和方法
1.1 实验动物 昆明种小鼠30只，雌雄各半，体重20～25 g，由徐州医学院实验动物中心提供，实验前1天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日上午9：30～12：00进行实验。
1.2 实验药品 丙泊酚注射液（Fresenius Kabi AB公司，批号：UL16844），磷酸川芎嗪注射液（河南天方药业股份有限公司，批号：080540180），均用生理盐水（NS）稀释成所需浓度。
1.3 主要仪器 BA-500小鼠避暗仪（成都泰盟科技有限公司）。
1.4 动物分组及处理 按分层随机区组设计，使各组小鼠雌雄比例、平均体重基本相同，将小鼠分为3组：生理盐水组（NS组）、丙泊酚（10mg·kg-1）组（P组）、川芎嗪（100 mg·kg-1）+丙泊酚（10mg·kg-1）组（LP组），每组10 只。训练前30 min，LP组腹腔注射川芎嗪，P组注射NS；15 min后，LP组、P组再腹腔注射丙泊酚。训练前15 min，NS组腹腔注射生理盐水。所有的药物均按照10 ml·kg-1的剂量给予。
1.5 避暗实验 实验装置分为明暗两室，两室之间有一直径为3 cm的圆洞，暗室底部铜栅通电。训练时先将小鼠放入反应箱中适应5 min，然后暗室底部铜栅通以33 V、50 Hz交流电，将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室即受电击。训练时潜伏期大于180 s者弃去不用。用药后24 h再次将小鼠放入明室，记录第1次进入暗室的时间（潜伏期）和5 min内进入次数（错误次数）。如果5 min时小鼠仍未进入暗室，错误次数记为0次，潜伏期记为300 s。
1.6 统计学处理 错误次数及潜伏期均用± s表示，用SPSS 13.0软件进行数据处理，用单因素方差分析LSD检验，检验水准：α = 0.05。
2 结 果
与NS组相比，P组潜伏期缩短，错误次数增加（P<0.05）；与P组相比，LP组错误次数明显减少（P<0.01），潜伏期有增长趋势，但差异无显著性（P>0.05）。见表1。表1 川芎嗪对丙泊酚所致小鼠记忆障碍的影响
3 讨 论
国内外常用避暗实验来研究记忆。避暗实验是利用小鼠嗜暗习性而设计的，属于被动回避反应（passive avoidance response），以潜伏期和错误次数作为指标，动物间差异较小，对记忆过程特别是对记忆的再现有较高的敏感性。
丙泊酚是目前临床最常用的静脉全身麻醉药物之一，具有起效快速、苏醒迅速、持续输注后无蓄积等优点，因而普遍用于临床麻醉诱导与维持、ICU镇静等。γ-氨基丁酸（γ-butylamino acid， GABA）受体是丙泊酚重要的作用靶位，可使Cl-内流，产生超极化，从而降低神经元兴奋性[7]；此外，丙泊酚对N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）受体激活也有一定抑制作用[8]，此作用也可能参与对记忆的抑制。
川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，化学结构为四甲基吡嗪。近期研究显示川芎嗪对海马神经元的Ca2+通道有阻滞作用，可以明显保护海马神经元。而海马神经元与记忆密切相关[9]。根据文献报道，川芎嗪可能激活胆碱能神经系统的活性，提高脑内乙酰胆碱的含量[9-10]。本实验结果表明，小鼠腹腔注射川芎嗪对丙泊酚所致的学习记忆障碍有改善作用可能与上述作用有关。也可能与其扩张血管，促进脑循环作用有关，有待进一步深入研究。
【参考文献】
[1] 孙国勤，徐惠芳，江伟，等. 异丙酚对顺行性遗忘和逆行性遗忘的影响[J]. 中华麻醉学杂志，2000，20（10）：612-614.
[2] 许继元，戴体俊，莫逊，等. 丙泊酚对小鼠学习记忆功能的影响[J]. 徐州医学院学报，2008，28（1）：1-3.
[3] 周昌奎，吴晓华. 川芎嗪临床应用及研究进展[J]. 海峡药学，2004，16（6）：3-4.
[4] 王艳萍，李文兰，范玉奇. 川芎嗪药理作用的研究进展[J]. 药品评价， 2006，3（2）：144-150.
[5] 纳鑫，汪雪兰，皮荣标. 川芎嗪对中枢神经系统的药理作用及其机制的研究进展[J]. 中药新药与临床药理，2008，19（1）：77-79.
[6] 王擒云，杨建平，戴体俊，等. GABA_A受体部分介导丙泊酚在中脑导水管周围灰质腹外侧区的致痛觉过敏作用[J]. 中国药理学通报，2006，22（2）：175-180.
[7] 魏辉明，李棋，于涛，等. 丙泊酚对中枢神经系统突触后膜受体反应性的影响及机制[J]. 昆明医学院学报，2006，27（4）：135-139.
[8] 高长越，周华东，邓娟，等. 川芎嗪对脑缺血再灌注损伤后细胞间粘附作用的影响[J]. 中国中西医结合急救杂志，2002，9（3）：135-139.
[9] 孙文虹，丁晓飞，郭丽萍，等. 川芎嗪促进促进大鼠学习记忆的研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版，2004，20（1）：11-16.
[10] 祖莹，万梅绪，倪小虎，等. 川芎嗪改善东莨菪碱致大鼠学习记忆障碍研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版 ，2005，21（6）：681-683.