盐生杜氏藻RNAi应用中的电激转化条件

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采用了两种电激模式-高电场强度低电容模式下3~7kV/cm和低电场强度高电容模式下300-500V/cm转化质粒pBl221-cat;PCR扩增检测cat基因部分序列及组织化学染色法GUS检测也同时证明质粒pBl221-cat在盐生杜氏藻中瞬时表达。在此基础之上,插入pds基因的正反向重复序列,构建RNAi表达载体pBIRNAI-Dsa,电激方法转入杜氏盐藻细胞,荧光定量PCR结果表明,转入干涉载体pBIRNAI-Dsa的实验组的pds基因表达显著下降,最低达对照组的28%,表明表达受到抑制。
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