晶状体损伤对视神经损伤后RGCs的保护作用及其机制

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背景 大鼠Müller细胞提取液能够促进离体培养的视网膜神经节细胞(RGCs)存活及轴突的再生,伴晶状体损伤的视神经外伤眼RGCs存活率提高,但Müller细胞和晶状体损伤在促进RGCs存活方面的关系鲜见报道.目的 探讨伴晶状体损伤的视神经外伤眼Müller细胞对RGCs存活的促进作用及其机制.方法清洁级成年Wistar大鼠48只按随机数字表法随机分为伪手术组、视神经损伤组、晶状体联合视神经损伤组.伪手术组大鼠手术中暴露但不损伤视神经,视神经损伤组大鼠行视神经横断伤,晶状体联合视神经损伤组行视神经横断伤联合晶状体针刺伤,并导致晶状体混浊.术后7d及14 d各组分别取8只大鼠处死后制备视网膜标本.采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠视网膜和RGCs的形态学改变,采用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜内核层胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的Müller细胞,光学显微镜下计数各组大鼠RGCs数量及GFAP阳性标记的Müller细胞数量. 结果 术后7d及14 d,伪手术组大鼠RGCs的数量分别为(52.98±1.90)个/高倍视野和(51.81±3.09)个/高倍视野,差异无统计学意义(t=0.910,P=0.378);术后14d视神经损伤组大鼠RGCs数量为(22.67±1.94)个/高倍视野,明显少于术后7d的(36.61±1.69)个/高倍视野,差异有统计学意义(t=15.312,P=0.000);术后14 d晶状体联合视神经损伤组RGCs数量为(35.69±1.80)个/高倍视野,明显少于术后7d的(50.76±2.77)个/高倍视野,差异有统计学意义(t=12.920,P=0.000).术后7d及14d,晶状体联合视神经损伤组存活的RGCs数量均多于视神经损伤组,差异均有统计学意义(7 d:扛102.840,P=0.000;14 d:t=164.020,P=0.000);术后14d晶状体联合视神经损伤组存活的RGCs数量少于伪手术组,差异有统计学意义(t=187.04,P=0.034).术后7d及14d,伪手术组大鼠视网膜内核层均未见GFAP阳性标记的Müller细胞;视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性标记Müller细胞数量分别为(29.38±2.04)个/高倍视野和(19.07±2.14)个/高倍视野,差异有统计学意义(t=-9.868,P=0.000).晶状体联合视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性标记的Müller细胞数量分别为(48.96±2.80)个/高倍视野和(46.73±1.50)个/高倍视野,差异无统计学意义(t=1.987,P=0.067).术后7d及14d,晶状体联合视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性Müller细胞数量均较视神经损伤组增多,差异均有统计学意义(7d:t=-15.997,P=0.000;14 d:t=-29.938,P=0.000). 结论 在视神经损伤合并晶状体刺伤时,晶状体损伤可诱导Müller细胞活化,进而促进视神经损伤后RGCs的存活。

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