目的探索一种安全、便捷、有效的用于微量精子冷冻的方法。方法选择内径130μm的玻璃剥卵针50支作为冷冻载体,进行10个周期的反复冻融,检测其完整性,计算不同冷冻周期中载体折损率。选取50例经检测合格的精液标本,将密度调整至(0.5~1)×10~6/ml,使用精子冷冻保护剂按照1∶1体积混合预平衡10 min,每份标本装载2支载杆,计算装载时间,其中1支载杆作为快速冷冻组,迅速投入液氮中冷冻保存,另1支载杆采用液氮熏蒸30 min后再投入液氮中保存,比较两种方法解冻后精子的复苏率。结果 50支冷冻载体中,其中有36支完成全部10轮的冷冻-复苏周期测试,折损率为28.0%,损坏原因中78.6%为金属镊子直接夹持导致玻璃剥卵针破裂。玻璃剥卵针至少可耐受4个周期反复冻融,但之后约4%~6%的会出现自发破损。100支冷冻载体装载精子时间为45~398 s,平均为(112.3±94.1)s。冷冻前平均精子活力为65.6%±9.9%,快速冷冻复苏后平均精子活力为36.64%±8.7%,熏蒸法冷冻复苏后平均精子活力为23.48%±6.2%。快速冷冻法精子复苏率为55.9%±11.0%,熏蒸冷冻法精子复苏率为36.3%±9.8%,两者比较,差异具有统计学意义(F=18.31,P<0.01)。结论采用剥卵针作为冷冻载体,并配合快速冷冻法,冷冻保存微量精子是一种安全、有效、简便的方法,适合临床广泛开展。