大豆铁结合蛋白基因cDNA的克隆、序列分析和表达载体的构建

来源 :西南农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liu605199097
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根据已报道的植物铁结合蛋白基因的保守序列设计引物,用RT-PCR方法,成功地从大豆总RNA中扩增出一大小为0.771kb的cDNA片断.将该片段克隆到pUCm-T载体上,测序和序列的同源性分析表明该片断与Proudhon等(1996)报道的大豆铁结合蛋白基因的氨基酸序列同源性达95%.利用pUCm-T和pBI121载体上共同的XbaⅠ和SacⅠ双酶切位点,构建了克隆片段的植物表达载体pSFKna.该载体含CaMV35S启动子、NOS终止子和NPT-Ⅱ基因,在遗传转化中可用基因枪导入受体,并通过卡那霉素抗性
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