目的:利用噬菌体展示技术,从Griffin1Library人源噬菌体单链抗体库中筛选出人源抗肝癌单链抗体。方法:扩增Griffin1Library人源噬菌体单链抗体库后,以甲胎蛋白(AFP)为包被抗原,用免疫试管法富集筛选人源抗肝癌单链抗体,用ELISA法鉴定获得的阳性克隆,对其基因进行测序。将淘选出的阳性单链抗体噬菌体载体用CaCl2法转化到E.coli HB2151菌株中用于表达可溶性单链抗体,然后采用镍亲和层析柱对表达的蛋白进行纯化。结果:经过3轮富集和筛选,共获得含有单链抗体片段的阳性克隆11个,其中3个克隆与AFP结合为阳性,DNA序列分析表明3株中2个克隆(A3、F10)含有完整的scFv基因片段,1个克隆(C11)含有部分scFv基因片段。SDS-PAGE检测单链抗体蛋白质的分子质量为28kU。结论:成功从Griffin1Library人源噬菌体单链抗体库中筛选出人源抗肝癌单链抗体。