猪瘟病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ie286

【摘要】

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为表达猪瘟病毒E0蛋白并制备其多克隆抗体，本研究构建E0蛋白的原核表达载体，转化至BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达，亲和层析及切胶回收纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Westernblot分析显示E0

【作者】

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贾俊杰张必凯张莉谢金鑫郭焕成龚文杰涂长春

【机构】

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军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

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2016年5期

【关键词】

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猪瘟病毒 E0蛋白原核表达多克隆抗体 Classical swine fever virusprokaryotic expression E0 protei

【基金项目】

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中国博士后科学基金项目（2013M532129）,国家自然科学基金项目（31130052331572528）

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为表达猪瘟病毒E0蛋白并制备其多克隆抗体，本研究构建E0蛋白的原核表达载体，转化至BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达，亲和层析及切胶回收纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Westernblot分析显示E0重组蛋白主要以包涵体形式表达，亲和层析纯化获得了E0重组蛋白，用其免疫Balb／c小鼠4次制备E0重组蛋白的多克隆抗体。间接ELISA显示，免疫小鼠血清中EO蛋白抗体效价为1：50000。获得的E0蛋白多抗能与病毒感染细胞及E0-EGFP融合表达细胞中天然结构的E0蛋白发生特异性反应。本研究制备的E0

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