用亲水性的C16硅胶反相色谱柱分离测定血清样品中的雌激素

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将亲水性较强的C16硅胶反相色谱柱应用于血清样品中β-雌二醇、雌三醇、雌酮和17α-乙炔基雌二醇的分离.实验对分离条件进行了优化,得到的最佳色谱条件是:柱温40℃,流速1 mL/min,以40%乙腈水溶液作等度洗脱.在此条件下4种雌激素可在大约26 min内实现基线分离,得到的4个色谱峰峰型对称.分离后的4种雌激素用紫外检测器在200 nm处进行测定,方法对β-雌二醇、雌三醇、雌酮和17α-乙炔基雌二醇的检出限分别为0.024、0.015、0.012和0.016 mg/L;校正曲线的线性范围为2~3个数量级,相关系数为0.998以上.方法应用于血清样品的测定,β-雌二醇、雌三醇、雌酮和17α-乙炔基雌二醇的标准加入回收率分别为96.3%、103.7%、100.1%和95.2%.
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