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淀粉酶链霉菌BAC基因组文库的构建及鉴定

来源 :激光生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangrong2000

【摘 要】

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提取淀粉酶链霉菌SM33基因组DNA，用Hind III部分酶解后回收40kh～60kb大小的高分子量DNA，与质粒载体pIndigoBAC536连接，电击转化EP1300感受态细胞，经蓝自斑筛选共挑取了5184个白色

【作 者】

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侯松涛 王波 张贝贝 葛亚东 王宝娟 朱国萍 

【机 构】

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安徽师范大学生命科学学院分子进化重点实验室,安徽师范大学分子生物学及生物技术研究所

【出 处】

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激光生物学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

淀粉酶链霉菌 基因组 细菌人工染色体(BAC)文库 Streptomyces diastaticus   genome   bacterial artifici 

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30500300）,国家教育部“新世纪优秀人才支持计划”（NCEFT-06-0558）,安徽省优秀青年科技基金（06043089）,安徽省引进海外留学人才基金（NO.20052032）,安徽省教育厅自然科学基金重点项目（2006KJ061A）,重要生物资源保护与利用研究安徽省重点实验资助.

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提取淀粉酶链霉菌SM33基因组DNA，用Hind III部分酶解后回收40kh～60kb大小的高分子量DNA，与质粒载体pIndigoBAC536连接，电击转化EP1300感受态细胞，经蓝自斑筛选共挑取了5184个白色克隆。从文库中随机挑选10个克隆，酶切检测平均插入片段约为50kh，覆盖了32．4倍基因组。并且插入片段均具有9～15个Not I酶切位点，符合链霉菌基因组特征。通过对BAC文库的筛选，获得苹果酸脱氢酶基因（mdh）的保守序列，与已知的链霉菌mdh具有很高的相似性。淀粉酶链霉菌BAC基因组文

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