快速蛋白液相色谱系统阴离子交换层析纯化人抗地高辛单链抗体

来源 :军医进修学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RK0707
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目的:将快速蛋白液相色谱系统(FPLC)与阴离子交换层析相结合,探索在大肠杆菌(E.coli)分泌表达的人抗地高辛(Dig)单链抗体(ADAscFv)的纯化条件. 方法:①通过培养E.coli HB2151将人ADAscFv分泌表达至培养基中,离心制备培养基上清;②加入硫酸铵,收集其饱和度为0~50%的组分即为初步纯化的人ADAscFv;③将阴离子交换色谱柱与FPLC相连接后上样,分别采用含NaCl的Tris-HCl缓冲液进行线性浓度梯度洗脱及阶梯浓度梯度洗脱,紫外分光光度计自动检测洗脱峰;④通过ELIS
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