载体因素对非病毒基因治疗体内实验方法的影响

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目的探讨非病毒基因治疗方法质粒载体和质粒包装载体对表达效率的影响,以获得一种较理想的高表达基因治疗方法.方法构建多种人生长激素基因真核表达载体,分别和脂质体LipofectAMINETM、多聚物聚乙烯吡咯烷酮(PVP)结合,大鼠胫前肌肌肉注射,1周时放射免疫法检测血清中hGH,注射部位肌肉匀浆后多聚酶链反应(PCR)、逆转录(RT)-PCR检测.结果质粒载体与LipofectAMINETM、PVP结合后,1周时hGH血清均得到表达,0.7~1.4 μg/L之间;PCR、RT-PCR均为阳性.hGH表达均显著高于裸露质粒组(P<0.05).结论非病毒基因治疗骨骼肌注射方法受不同质粒载体的影响,与脂质体或人工多聚物结合后能显著提高表达率.
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