【摘 要】
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为建立能检测蚊体内恶性疟原虫的聚合酶链反应技术,根据恶性疟原虫 CSP基因序列,设计合成1对引物,以Chelex-100煮沸法制备DNA模板,采用PCR方法,恶性疟原虫子孢子模板预期被扩
【机 构】
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深圳市卫生防疫站,广东,深圳,518020;上海第二军医大学,上海,200433;同济医科大学,湖北,武汉,430030
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为建立能检测蚊体内恶性疟原虫的聚合酶链反应技术,根据恶性疟原虫 CSP基因序列,设计合成1对引物,以Chelex-100煮沸法制备DNA模板,采用PCR方法,恶性疟原虫子孢子模板预期被扩增出245 bp的DNA条带,并将该法与蚊虫解剖镜检子孢子方法相比较. 结果经人工感染恶性疟原虫的31只大劣按蚊中14只PCR阳性,被扩增出预期大小的DNA 片段,其余17 只PCR阴性;以该技术检测野外捕捉的98只按蚊,结果均为阴性.PCR法与解剖镜检法相比较,检测结果完全符合;相当于1/10个阳性蚊子的模板即可满足PCR检测. 该检测体系灵敏、特异,对于蚊体内恶性疟原虫的检测具有一定的应用价值.
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