【摘 要】
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目的采用成簇的、规律间隔的短回文重复序列/核酸内切酶9(CRISPR/Cas9)基因组编辑技术构建白细胞介素6(IL-6)基因敲除结肠癌SW1116细胞系,探讨其对化疗药物顺铂(CDDP)的敏感
【机 构】
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广东医科大学/广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞523808广东医科大学/东莞市医学活性分子开发与转化重点实验室,广东东莞523808;广东省东莞市第五人民医院病理科 523900;广东医科大学/
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目的采用成簇的、规律间隔的短回文重复序列/核酸内切酶9(CRISPR/Cas9)基因组编辑技术构建白细胞介素6(IL-6)基因敲除结肠癌SW1116细胞系,探讨其对化疗药物顺铂(CDDP)的敏感性。方法采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,构建IL-6基因敲除的SW1116细胞系;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;Western blot法检测细胞IL-6、cyclin E、Bax、Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达。结果成功构建了IL-6-/+SW1116和IL-6-/-SW1116细胞系;IL-6-/+SW1116和IL-6-/-SW1116细胞与野生型SW1116细胞相比,其生长状态、细胞增殖能力、细胞周期及细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05);5mmol/mL CDDP干预后,IL-6-/-SW1116细胞凋亡率明显增加、细胞增殖受到明显抑制、细胞内Bax表达明显增高,Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了对CDDP敏感,且生长增殖周期稳定的IL-6-/-SW1116细胞系,可为IL-6介导的结肠癌化疗耐药机制研究提供实验基础。
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