【摘 要】
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采用PCR方法从三黄鸡血液基因组中扩增鸡α干扰素全基因,并克隆和测序.序列分析表明,基因全长为582 bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489 bp.将该片段与表达载体pET-28a连接克隆
【机 构】
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河南省康星药业有限公司,郑州牧业工程高等专科学校,辽宁省辽阳市种畜场
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采用PCR方法从三黄鸡血液基因组中扩增鸡α干扰素全基因,并克隆和测序.序列分析表明,基因全长为582 bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489 bp.将该片段与表达载体pET-28a连接克隆至大肠埃希菌DH5α菌株,经测序和酶切鉴定,选取正向插入、读码框正确的阳性克隆.构建重组质粒并转化BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白以包涵体形式在BL21 (DE3)高效表达,经His亲和层析柱得以纯化.鸡胚试验表明,重组干扰素抵抗新城疫病毒效果显著,能保护鸡胚并能够延迟和减少新城疫病毒的复制.
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