应用均匀设计优化文冠果ISSR-PCR反应体系

来源 :山西农业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zmaozhao
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采用均匀设计,对引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg^2+浓度和dNTP浓度4个因素分别设置5个水平,对文冠果ISSR-PCR反应体系进行优化,在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测,构建了文冠果ISSR-PCR优化反应体系,在20 μL ISSR-PCR反应体系中,各因素的最佳浓度分别为:2×PCR buffer、0.2mmol·L^-1dNTP、0.3μmol·L^-1引物、2.5 mmol·L^-1 Mg^2+和0.4 U Taq
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