【摘 要】
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目的 探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及
【机 构】
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兰州大学第二医院急救中心危重病科, 甘肃兰州,730030
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目的 探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保护作用.方法 选择MODS患者20例,用其血清对HUVEC进行干预,建立体外细胞损伤模型,同时以健康血清组和胎牛血清组作对照,将细胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODS血清损伤组(MODS患者血清浓度分别为C1组5％、C2组10％、C3组20％)和GSH干预组(10％ MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓度分别为D1组0.064 mmol/L、D2组0.32 mmol/L、D3组1.6 mmol/L、D4组8.0 mmol/L、D5组40mmol/L).采用MTT法检测各组细胞生存率;荧光倒置显微镜下观察B组和C2组HUVEC形态学变化;分别检测B组、C2组和D3组药物干预24、48、72 h后细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和总抗氧化能力(T-AOC)水平,同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.结果 ①B组细胞生存率与A组比较差异无统计学意义(P＞0.05),C1、C2、C3组细胞生存率较B组明显下降(P＜0.05),D2、D3、D4组细胞生存率较C2组明显升高(P＜0.05);②C2组HUVEC显微镜下可见损伤性改变,细胞变大变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落;③C2组细胞培养上清液SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平较B组下降,而D3组各时间点较C2组均明显升高,其中以药物干预72 h后升高更明显;④C2组细胞内ROS水平较B组明显升高,D3组各时间点ROS水平较C2组明显降低,其中以药物干预72 h后下降最明显.结论 MODS患者血清可造成内皮细胞损伤,GSH可通过提高SOD 、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平,降低细胞内ROS水平,从而发挥内皮细胞保护作用,减轻血管内皮细胞的氧化损伤.
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