转化生长因子-β1对肺成纤维细胞中IncRNA-ATB和纤维化因子mRNA水平的影响

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[目的]研究转化生长因子(TGF)-β1刺激肺成纤维细胞MRC-5后被TGF-β活化的长链非编码RNA (IncRNA-ATB)和Ⅰ型胶原蛋白(colⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)以及纤连蛋白(FN)等纤维化因子基因mRNA水平的变化及其相关性.[方法]将成纤维细胞株MRC-5以5x103个/孔的密度种于96孔板中,分别经浓度为0、2.5、5.0、10.0 ng/mL的TGF-β1刺激24h后,通过MTT法测定细胞增殖活性,采用实时荧光定量PCR法检测MRC-5细胞中IncRNA-ATB、ColⅠ、Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平.采用Spearman秩相关检验分析IncRNA-ATB与ColⅠ、Col Ⅲ、FN3个基因mRNA相对水平之间的相关性.[结果]随着TGF-β1刺激浓度的增加,MRC-5细胞增殖活性增高,5.0、10.0 ng/mL组的细胞增殖活性分别是0 ng/mL组的1.07倍和1.12倍(P<0.05).随TGF-β1浓度的增加,2.5、5.0、10.0 ng/mL组中FN的mRNA水平分别是0 ng/mL组的2.11倍(P=0.018)、3.58倍(P=0.03)和6.51倍(P<0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅰ的mRNA水平分别是0ng/mL组的1.28倍(P=0.324)、4.64倍(P<0.01)和3.97倍(P<0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅲ的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.21倍(P=0.400)、1.42倍(P=0.120)和4.23倍(P<0.01).2.5、5.0、10.0 ng/mL组中IncRNA-ATB的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.80倍(P=0.073)、3.57倍(P<0.01)和4.55倍(P<0.01).此外,相关性分析结果显示,IncRNA-ATB与FN (r=0.86)、Co/Ⅰ(r=0.85)和ColⅢ(r=0.82)的mRNA相对水平呈正相关关系(均P<0.05).[结论]TGF-β1可刺激成纤维细胞增殖,升高IncRNA-ATB、Col Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平.IncRNA-ATB与纤维化因子的表达呈正相关,提示其可能与肺纤维化的发生有关.
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