【摘 要】
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目的 研究宫内干细胞移植技术在血友病治疗中的应用前景.方法 采用宫内干细胞移植技术将RFP转基因小鼠骨髓单核细胞注射到胎鼠腹腔,在受体小鼠出生后,采用RT-PCR技术检测其嵌
【机 构】
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复旦大学生命科学院遗传学研究所,上海交通大学医学院医学遗传学教研室,上海南方模式生物研究中心
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目的 研究宫内干细胞移植技术在血友病治疗中的应用前景.方法 采用宫内干细胞移植技术将RFP转基因小鼠骨髓单核细胞注射到胎鼠腹腔,在受体小鼠出生后,采用RT-PCR技术检测其嵌合率.结果 在普通昆明幼鼠的移植方面,共注射53只胎鼠,29只出生,受体胎鼠出生率为55％,嵌合频率为79％,单只小鼠平均嵌合率可达5％,最大嵌合率可达21％.在血友病A小鼠的治疗方面,共对21只怀孕母鼠进行了手术,只有5只母鼠成功生产,共产下18只幼鼠,有11只是血友病A(FⅧ基因缺陷)纯合子.11只纯合子代幼鼠有8只在出生时或出生后死亡.所有纯合子代的嵌合率都在1％以下,纯合子代幼鼠的出血时间达10 min以上,并没有凝血迹象.结论 通过宫内干细胞移植技术成功将供体干细胞植入受体胚胎内,并参与了受体胚胎的生长发育过程,证明了该技术在血友病治疗上的可行性,但由于受各种因素的限制,导致目前嵌合率还达不到可治疗的水平,移植方法仍需改进.
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