【摘 要】
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目的构建α-突触核蛋白的原核表达系统,通过蛋白纯化的定量测定,确定表达这一蛋白的最合适载体和纯化方法,为进一步研究帕金森病病理机制奠定基础。方法将含有α-突触核蛋白D
【机 构】
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长春医学高等专科学校内科教研室,吉林大学第二医院妇产科,北华大学基础医学院
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目的构建α-突触核蛋白的原核表达系统,通过蛋白纯化的定量测定,确定表达这一蛋白的最合适载体和纯化方法,为进一步研究帕金森病病理机制奠定基础。方法将含有α-突触核蛋白DNA序列的质粒pET3 a-Syn和pGEX-4T-1-Syn分别转入BL21(DE3),IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)诱导表达,分别采用HPLC和亲和层析的方法进行纯化。纯化后的蛋白进行SDS-PAGE电泳检测纯度,BCA法进行定量比较。结果构建了α-突触核蛋白两种载体的原核表达系统。pET3 a-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得20
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