【摘 要】
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目的观察双乌宣痹颗粒对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响,探讨其作用机制。方法胶原酶消化法分离RA患者膝关
【机 构】
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原广州军区广州总医院中医科,广州中医药大学研究生院
【基金项目】
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国家自然科学基金(81573883);广东省科技计划(2015B020233011);广州市科技计划(201704020160);军队后勤科研项目(CGZ16C007)~~
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目的观察双乌宣痹颗粒对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响,探讨其作用机制。方法胶原酶消化法分离RA患者膝关节FLS,传代培养并鉴定后,取4~7代细胞用于实验。RA-FLS分别用高[17.28g/(kg.d)]、中[8.64g/(kg.d)]、低[4.32g/(kg.d)]剂量双乌宣痹颗粒含药血清培养24h,即高、中、低剂量双乌宣痹组;另设阳性药物对照[来氟米特,1.04mg/(kg.d)]组和阴性对照(生理盐水)组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blotting检测PI3K、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果高、中、低剂量双乌宣痹含药血清及来氟米特含药血清均能明显促进FLS的凋亡,下调PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白表达,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与来氟米特组比较,高、中双乌宣痹组PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达明显下调,Bax蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双乌宣痹含药血清能促进RA-FLS凋亡,下调Bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白的表达,这可能是其治疗RA的机制之一。
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