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目的：探讨高效液相梯度洗脱法（HPLC）用于复方诺氟沙星滴耳液中甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松3种含量同时测定的可行性及效果。方法：建立HPLC条件为5μm，4.6mm×250mm Kromasil C18柱，以甲醇-乙腈-磷酸溶液（0.025mol/L，pH=3.0）-注射用水作为流动相，测定复方诺氟沙星滴耳液中甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松的含量。结果：测得甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松的线性范围依次为15.0～151.0μg/ml、14.9～150.1μg/ml、2.5～26.0μg/ml，平均回收率依次为99.8%、99.6%、99.7%；RSD依次为0.79%、0.81%、0.91%。结论：采用HPLC法同时测定复方诺氟沙星滴耳液有效成分含量操作简便快速，且准确度较高，可用于复方诺氟沙星滴耳液的质量控制。