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目的:探讨高效液相梯度洗脱法(HPLC)用于复方诺氟沙星滴耳液中甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松3种含量同时测定的可行性及效果。方法:建立HPLC条件为5μm,4.6mm×250mm Kromasil C18柱,以甲醇-乙腈-磷酸溶液(0.025mol/L,pH=3.0)-注射用水作为流动相,测定复方诺氟沙星滴耳液中甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松的含量。结果:测得甲硝唑、诺氟沙星以及丙酸倍氯米松的线性范围依次为15.0~151.0μg/ml、14.9~150.1μg/ml、2.5~26.0μg/ml,平均回收率依次为99.8%、99.6%、99.7%;RSD依次为0.79%、0.81%、0.91%。结论:采用HPLC法同时测定复方诺氟沙星滴耳液有效成分含量操作简便快速,且准确度较高,可用于复方诺氟沙星滴耳液的质量控制。