新基因HSPCSET的蛋白结构分析和功能初探

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mcl19800627
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目的 研究人脐血CD34+造血干/祖细胞来源的新基因HSPCSET的结构和生物学功能.方法 采用生物信息学技术对HSPCSET蛋白进行结构分析和同源性比较.酵母双杂交实验筛选与HSPCSET蛋白相互作用的蛋白分子,测序后筛选出功能较明确的阳性克隆进一步回复性杂交,采用β-gal实验和GST拉下试验验证.免疫荧光共定位方法 分析HSPCSET和相关基因细胞内定位情况.结果 蛋白结构分析和同源性比对揭示HSPCSET是古老的SET基因家族的成员,可能具有非常保守而重要的生物学功能.应用酵母双杂交技术筛选能与之相互作用的蛋白,获得13个阳性克隆,分别涉及信号传导、转录调控、细胞凋亡、肿瘤发生、发育等途径.与细胞增殖、分化、凋亡及肿瘤发生密切相关.采用GST拉下试验进一步在体外水平验证了其中4个基因:GADD34(凋亡相关分子)、SIVA(凋亡相关分子)、DNAJ(分子伴侣)和PHF](转录相关因子)与HSPCSET蛋白确实存在相互作用.免疫荧光共定位方法 显示HSPCSET和GADD34共转染细胞株后共同定位于细胞核内,两者之间存在强烈的相互作用.结论 新基因HSPCSET可能参与凋亡途径、具有非常保守而重要的生物学功能.本研究结果 为进一步研究HSPCSET在造血调控中的作用及研究肿瘤发生奠定基础。

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