构建cRNA作为标准曲线的实时RT-PCR检测方法

来源 :临床检验杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wsl526
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的建立一种新的基于LightCyclerTM技术,并通过构建cRNA标准曲线来对目的基因进行定量实时RT-PCR的检测方法.方法以T7 RNA聚合酶体外转录合成带有目的片段的cRNA作为标准品,并与样本同时进行反转录和PCR扩增,用此方法来检测目的基因在结直肠组织中的表达.结果采用cRNA标准品制作的标准曲线具有较好的线性关系(r>0.99),而且在每次实验中都能取得较好的扩增效率,CEA与GAPDH的扩增效率分别大于88.7%和87.4%.结论此方法能较为准确的对组织中的目的基因表达进行定量检测.
其他文献
矽肺合并肺部感染是矽肺的常见并发病症,预后差,死亡率高,长期预防性和治疗性使用抗生素,使患者对多种抗生素耐药。我们对本院209例50—75岁男性矽肺合并肺部感染的痰液标本总结
猪霍乱沙门菌(S.cholerae-suis)属于沙门菌属,2004年1月18日从一女性患者中分离到该菌,现报告如下.1 病历摘要患者,女56岁,糖尿病史.小腿部内侧外伤合并感染数日.于2004年1月
分析了国际分类法的不足,引入能见度因子对大气稳定度参数进行计算,分别利用两种分类计算方法计算上海市市某气象站1996年逐时气象资料,再对比分析不同分类结果后,得出能见度因子对大
胡锦涛同志在十六届五中全会上,明确提出了建设创新型国家的重大战略思想;2006年他又在全国科学技术大会上指出,要坚持走中国特色自主创新道路,用15年左右的时间把我国建设成
民法典的制定不是立法机关对立法程序的简单履行,是需要必要条件和充分条件的。民法的理念是民法典的灵魂,一部好的民法典,必须蕴含着完美的民法理念,且建立在适合民法存在的
在我国,传统审计模式存在很多缺陷和不足。借鉴国际经验可以看出,管理舞弊导向审计是审计方法发展的方向,为了推动我国审计事业的发展,我们应该积极地对管理舞弊导向审计理论
指出了当前汽车尾气净化催化剂的研究重点,主要在于提高催化剂的絷稳定性,降低催化剂的起燃温度及生产成本和催化剂的制备方法等四个方面,为了解尾气净化催化剂的研究现状及未来
目的探讨无锡地区慢性乙型重型肝炎HBV基因型和核苷酸多态性分布的特点.方法套式PCR扩增HBV DNA S基因后作序列分析.结果50例慢性乙型重型肝炎患者B基因型1例(2%),C基因型43
通过对生产用水、工业废水的平衡调查研究,有针对性地提出了节水措施。
Sysmex UF-100尿沉渣分析仪用于临床尿沉渣分析具有简便快速的优点。该仪器对尿液中有形成份直接进行荧光染色,利用流式细胞术和电阻抗原理,识别尿液中有形成份并进行计数。但