目的 观察人源性长寿保障基因2(LASS2)/肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响.方法 首先采用小片段RNA干扰技术沉默人前列腺癌细胞株PC-3M-2B4(低转移潜能)中LASS2/TMSG-1的表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术、免疫细胞化学法筛选干扰效率最高的小干扰RNA (siRNA)后,选取干扰效率最高的siRNA-2进行后续实验,通过体外侵袭实验、细胞划痕实验及黏附实验检测干扰LASS2/TMSG-1基因前后,PC-3M-2B4细胞侵袭转移能力的改变.结果 筛选出4条siRNA,以空白对照为1,siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-4的LASS2/TMSG-1 mRNA表达量分别为1.557、0.155、0.369及0.193;siRNA-2转染组穿膜细胞数为(21.20±1.21)个,细胞的侵袭能力明显高于无关阴性对照组[(l0.07±1.39)个]和空白对照组[(11.00±1.97)个,P＜0.01];siRNA-2转染组细胞划痕修复率[(64.90±0.56)％]明显高于无关阴性对照组[(26.46±0.31)％]和空白对照组[(22.18±0.57)％],差异有统计学意义(P＜0.01);细胞黏附30、60 min后,与无关阴性对照组[(29.83±0.15)％、(49.90±0.35)％]、空白对照组[(30.37±1.27)％、(50.20±0.06)％]比较,siRNA-2转染组细胞黏附率[(10.10±0.27)％、(30.37±0.30)％]明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 通过RNA干扰技术证实了LASS2/TMSG-1在肿瘤侵袭转移中的作用,证明它是一种肿瘤转移抑制基因。
特异性小片段干扰RNA降低人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因-1表达对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响
【摘 要】
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目的 观察人源性长寿保障基因2(LASS2)/肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响.方法 首先采用小片段RNA干扰技术沉默人前列腺癌细胞株PC-3M-2B4(低转移潜能)中LASS2/TMSG-1的表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术、免疫细胞化学法筛选干扰效率最高的小干扰RNA (siRNA)后,选取干扰效率最高的siRNA-2进行后续实验
【机 构】
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010059呼和浩特,内蒙古医科大学附属医院病理科暨内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室,010059呼和浩特,内蒙古医科大学附属医院病理科暨内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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