【摘 要】
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目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基（cinobufagin）对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表
【机 构】
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中国人民武装警察部队后勤学院,天津市第三中心医院,天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室
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目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基（cinobufagin）对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表达;以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,实验分为对照组、5μmol·L-1华蟾毒配基作用6、12和24 h组;单细胞电泳检测DNA双链断裂,Real time-PCR和Western blot检测损伤修复基因Mre11、Rad50、Nbs1和p53的表达变化,流式细胞术检测细胞周期。结果肝癌组织钠钾ATP酶α1亚单位表达与癌旁组织相比明显升高（P<0.05）;华蟾毒配基诱导HepG2细胞DNA断裂的发生率与作用时间高度相关,作用时间延长断裂效应更加明显（P<0.05）,Mre11,Nbs1,Rad50和p53表达随药物作用时间延长逐渐升高（P<0.05）,流式细胞术分析细胞周期对照组S期细胞比例为（21.32±4.21）%,5μmol·L-1华蟾毒配基处理6 h后为（33.25±5.72）%,处理12 h后为（56.72±6.29）%,作用24 h后为（67.32±9.42）%。结论华蟾毒配基激活Mre11/Rad50/Nbs1损伤感应复合体介导肝癌Hep G2细胞周期阻滞。
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